【レビュー】自己増殖型RNAワクチン

コントロールされた増殖可能なのだろうか？

 

Self-amplifying RNA vaccines for infectious diseases
Kristie Bloom, Fiona van den Berg & Patrick Arbuthnot
Gene Therapy volume 28, pages 117–129 (2021)

図1

A  5′ cap (m7G) と poly A tail はすべてのRNA転写産物に共通である。A 従来のmRNAは、ワクチンの免疫原とそれに付随する5′および3′UTRをコードしている。抗原や免疫療法は、非複製の転写物から翻訳される。

B 自己複製RNAは、5′および3′のCSE配列、nsP1-4遺伝子、サブゲノムプロモーター、およびワクチン免疫原をコードする。in situ翻訳後、nsP1-4タンパク質はRdRP複合体を形成し、CSE配列を認識してワクチンをコードする転写産物を増幅する。その結果、細胞内に抗原や免疫療法が蓄積されることになる。

C トランス増幅型mRNAは、自己増幅型RNAと同様の効果を得るために、2つの異なる転写産物を用いる。5′および3′UTRに挟まれたnsP1-4遺伝子をコードする従来のmRNAは、ウイルスのCSE配列、サブゲノムプロモーター、およびワクチン免疫原をコードする別の転写産物と一緒に送出される。従来のmRNAをin situで翻訳するとRdRP複合体が形成され、続いてワクチンをコードする転写産物が増幅され、抗原の蓄積や免疫療法が行われることになる。

UTR untranslated region, CSE conserved sequence elements, nsP1–4 nonstructural proteins 1–4, RdRP RNA-dependent RNA polymerase.

Property	Advantage	Disadvantage
効能・効果	従来のタンパク質ベースのワクチンに匹敵する有効性を持つ	プライム／ブースト投与が必要な場合もある
	その場で高いレベルのRNA増幅が行われる
	saRNAを持続的に高レベルで増幅・発現させた場合の影響についてはほとんど情報がない
	saRNAの活性は細胞質内で起こるため、DNAワクチンのような核移植は必要ない
	発現した抗原に対して、体液性および細胞性の反応が誘発される
	前臨床試験では、感染症に対する防御効果が確認されている
安全性	構造タンパク質のウイルス遺伝子がsaRNAレプリコンから取り除かれており、ウイルスのアセンブリーを防ぐことができる	RdRP複合体の免疫原性に関する情報はほとんどない。
	細胞質内で作用するため、統合の危険性がない	これまでの臨床データが少ない
合成	GMP in vitro transcriptionを用いた大規模な合成に適している
	異なる抗原に対する新しい配列を容易に合成することができる
	多価性または多病原性の配列を柔軟に組み込むことができる
NVVによるデリバリー	非ウイルス性ベクターを用いた送達が可能	通常、組織特異的な投与は行われない
	大規模な合成が可能な製剤	NVVsとsaRNAの免疫原性のバランス
	筋肉内、皮内、または皮下注射後の送達部位での発現

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NOVELTYコホート：医師診断 喘息 and/or COPD内のheterogeneity

 

NOVELTYコホート：医師診断 喘息 and/or COPD内のheterogeneity

http://makise.mobi/wp/2021/09/27/870/

特定個人への医師の診断でも、COPDと喘息で揺れ動く事例多数あり、一時点で喘息なのかCOPDなのかあるいはACOなのか断定できるのは不可能と思う。同じ俎上に乗せてその特性を検討するというのは喘息・COPD診断スペクトラムの実態理解の上に重要だと思う

元論文：

Heterogeneity within and between physician-diagnosed asthma and/or COPD: NOVELTY cohort | European Respiratory Society (ersjournals.com)

ベートーベンの難聴への詮索

歴史上の人物の死因や基礎疾患を詮索する分野があるが、近代に近い場合それが""プライバシーの権利は一身専属"であるといえど、“遺族の故人に対する「敬愛追慕の情」を侵害された”という問題が存在するらしい(https://www.rclo.jp/general/report/cat142/3446/)。

持病に関する追求も常識をわきまえなければならないということだろうか？ベートーベンの場合はそのエピソードが作品ともリンクしており、難聴をひた隠しにしたなど枚挙にいとまが無い。単なる好奇心ではなく人間としても興味を引く・・・

Beethoven’s Deafness

JAMA. 2021;326(11):1075. doi:10.1001/jama.2020.18134

Originally Published September 20, 1971 | JAMA. 1971;217(12):1697.

https://jamanetwork.com/journals/jama/fullarticle/2784370 

ベートーヴェンの難聴の原因を知っているか知らないかで、医学の実践も科学も、さらには医学史にも大きな影響を与えることはないだろう。それにもかかわらず、この遡及的診断の謎は多くの研究者の興味を引いてきた。その興味は現在も続いており、最近、この問題に関して2つの相反する見解が1ヶ月以内に発表されたことからも明らかである。

ベートーヴェンの難聴について書いた多くの耳鼻科医と同じように、Larkin¹は耳硬化症の診断を支持している。作曲家が27歳のときに始まったこの病気は、激しい耳鳴り、初期の高音域の喪失、そして徐々に進行して15年後には完全な聴力喪失という特徴的なパターンを示した。この障害に付随して、頻繁に起こる感染症、大腸炎、リウマチ、脾臓肥大、慢性膵炎、慢性肝炎が進行し、肝不全となって死に至った。ラーキンは、このような症状の集合体は、タンパク質異常症や結合組織障害を示唆していると考えている。

また、ベートーベンの難聴を骨のパジェット病と結びつけて考えるNaiken²は、まったく別の視点から、ベートーベンの難聴を骨のパジェット病と結びつけて考えます。この仮説に賛成なのは、作曲家の頭蓋骨、顔、体の物理的特徴、骨と神経の難聴の組み合わせ、そして、高密度で厚い頭蓋骨の丸み、聴神経の萎縮、側頭骨の軟骨部分の血管の有無などの剖検所見である。この診断に反して、Paget病では典型的ではない難聴の早期発症があります。

LarkinもNaikenも、ベートーヴェンの難聴は梅毒が原因であるという、McCabe³が復活させた古い見解を受け入れていません。この見解は、ベートーヴェンの難聴がもたらした魅力の多くに関係していると考えられる。性病という汚名は、悲劇にピリッとしたアクセントを与えてくれる。因みに、死後のプライバシー侵害の是非も問われている。生前に診断結果、特に「“social disease”の診断結果を公表することは、法的にも道徳的にも非難されるべきことであった。このような判断は、患者の死によって終わるべきなのだろうか。

ベートーヴェンの耳が聞こえないことへの関心が続いている理由は、好奇心の「無為」性を考慮した上で、その先にある深い原因を探らなければならない。そのヒントは、天才的な音楽家から聴覚を奪った運命の厳しい皮肉にあるかもしれない。Miltonが盲目になったとき、彼の娘が読み書きしてくれたが、ベートーヴェンは誰も助けてくれなかった。しかし、彼は永遠の音楽を創り出すことができた。聴覚を失った原因よりも、逆境に立ち向かっていった彼の姿こそが、より深い驚きと探求に値するのではないだろうか。

唾液ベースのRT-PCRを無症候性COVID-19スクリーニングに使用すべきではない

 唾液ベースのRT-PCRを無症候性COVID-19スクリーニングに使用すべきではない

 内科開業医のお勉強日記　III (makise.mobi)

Necroptosis Signaling : COPD炎症・気道リモデリング・気腫

• ネクロプトーシス誘導分子RIPK3による細胞死と炎症の制御

https://seikagaku.jbsoc.or.jp/10.14952/SEIKAGAKU.2019.910265/data/index.html

• MLKL(mixed lineage kinase domain-like) :This protein plays a critical role in tumor necrosis factor (TNF)-induced necroptosis, a programmed cell death process, via interaction with receptor-interacting protein 3 (RIP3), which is a key signaling molecule in necroptosis pathway.

Necroptosis Signaling Promotes Inflammation, Airway Remodeling, and Emphysema in Chronic Obstructive Pulmonary Disease

Zhe Lu , et al.

American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Volume 204, Issue 6 

https://doi.org/10.1164/rccm.202009-3442OC       PubMed: 34133911

【根拠】RIPK3(receptor-interacting protein kinase 3)とMLKL(mixed lineage kinase domain-like)を介したNecroptosisは、組織の炎症や破壊を促進する制御された壊死の一形態であるが、慢性閉塞性肺疾患(COPD)の病態への寄与は十分に理解されていない。

【目的 COPDにおけるNecroptosisの役割を明らかにすること。

【方法】COPD患者とCOPDでない対照者の肺組織におけるRIPK3とMLKLの総量と活性（リン酸化）を測定した。たばこの煙で実験的にCOPDを発症したマウスの肺と肺マクロファージにおいて，Necroptosis関連のmRNAとタンパク質，および細胞死を調べた。 Ripk3^−/− および Mlkl^−/−マウスのCS急性および慢性曝露に対する反応を野生型マウスと比較した。また、apoptosis (with the pan-caspase inhibitor quinoline-Val-Asp-difluorophenoxymethylketone [qVD-OPh]) とnecroptosis (with deletion of Mlkl in mice) の複合的な阻害効果を評価した。

【測定と主な結果】 重症のCOPD患者では、上皮とマクロファージの総MLKLタンパク質、肺組織のpRIPK3とpMLKLが、COPDではない非喫煙者や喫煙者の対照者と比較して増加していた。CS曝露マウスと実験的COPDの肺とマクロファージでは、Necroptosis関連のmRNAとタンパク質レベルが上昇していた。Ripk3またはMlklを欠損させると、CSの急性曝露による気道炎症を防ぐことができた。Ripk3の欠損は、慢性的なCS曝露後の気道の炎症とリモデリング、および肺気腫性病理の発症を抑制した。Mlkl欠損とqVD-OPh処理は、CSによる慢性気道炎症を抑制したが、Mlkl欠損のみが気道のリモデリングと肺気腫を予防した。Ripk3またはMlklの欠失とqVD-OPhの投与は、CSによる肺細胞死を減少させた。

【結論】NecroptosisはCS暴露によって誘導され、COPD患者の肺や実験的COPDで増加する。Necroptosisを阻害することで、CS誘導の気道炎症、気道リモデリング、肺気腫が軽減される。Necroptosisを標的として阻害することは、COPDの治療戦略として期待できる。

小児喘息への吸入ステロイドと肥満の関連はありそうだが、因果関係の可能性は？

  ｢体格の指標であるBMI（body mass index）は乳児期早期に増加傾向を示し、乳児期後期から減少に転じて、さらに幼児期に減少から増加に転じます。このBMIが幼児期に減少から増加に転じる現象はadiposity rebound（AR）｣と呼ぶ。

http://www.ncvc.go.jp/hospital/pub/clinical-research/untersuchung/post_259.html

Associations between Inhaled Corticosteroid Use in the First 6 Years of Life and Obesity-related Traits
Asja Kunøe et al.
 American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine  Volume 204, Issue 6
https://doi.org/10.1164/rccm.202009-3537OC       PubMed: 33975528

https://www.atsjournals.org/doi/10.1164/rccm.202009-3537OC

理論的根拠：乳幼児は、特に、吸入コルチコステロイド（ICS）による肥満度（BMI）、adiposity rebound (AR)、体組成への潜在的な臨床的副作用を経験しやすいかもしれませんが、この年齢層における長期研究ではほとんど検討されていません。

目的：生後6年間のICS曝露と、BMI、AR、体組成、および血中脂質濃度との関連を明らかにすること。

方法：COPSAC（Copenhagen Prospective Studies on Asthma in Childhood）の2つの母子コホートに属する小児を対象とした。ICSの使用は6歳までプロスペクティブに登録し，累積投与量を算出した。解析には重回帰モデルを用いた。

測定と主な結果：COPSACコホートの1,111人の子どものうち、合計932人（84％）がBMIデータを持ち、786人（71％）が6歳時の二重エネルギーX線吸収測定スキャンデータを持ち、815人（73％）がAR年齢を算出した。

291名（31％）の小児が、6歳までに10週間の標準的な治療よりも多いICS累積投与を受けていた。

0～6歳のICS治療は、BMI z-scoreの増加（0. AR年齢が-0.18歳（95％信頼区間，-0.28～-0.08歳，P＝0.0006），幾何平均体型脂肪率が2％増加した（P＝0.05）．

ICSの暴露と二重エネルギーX線吸収測定のデータは関連していなかった。

結論：幼児期のICS使用は，6歳時のBMI zスコアの増加，ARの早期化，android body fat percentageの増加と関連する傾向が見られた。

1週間治療RCT：睡眠時無呼吸症候群 Reboxetine + Oxybutynin

 閉塞型無呼吸に対する薬物治療に展望